Застосування цитології і молекулярної біології в діагностиці передракових або злоякісні ураження ротової порожнини

Source: http://www.molecular-cancer.com/content/5/1/11

Абстрактний

Раннє виявлення передракових або ракових уражень усних обіцянок поліпшити виживання і захворюваність пацієнтів, які страждають від цих умов. Цитологічне дослідження усного клітин неагресивних техніка, яка добре сприймаються пацієнтом, і, отже, привабливим варіантом для ранньої діагностики раку порожнини рота, в тому числі епітеліальної атипії і плоскоклітинний рак. Проте його використання було обмежене до цих пір через погану чутливості і специфічності в діагностиці злоякісних новоутворень усні. Останнім часом вона знову з'явилася з-за більш досконалих методів та його застосування в усній передраку і раку діагностичних і прогностичних методів, а також для моніторингу пацієнтів. Нові діагностичні методи, такі як "пензля біопсія" і молекулярних досліджень були розроблені.Останні досягнення в області цитологічні методи і нові аспекти застосування зскрібають або ексфоліативний цитології для виявлення цих поразок і прогнозування їх прогресування або рецидиву, в даному огляді.

Введення

Рак ротової порожнини є найбільш поширеною формою раку і є однією з основних проблем охорони здоров'я в країнах, що розвиваються, де основною причиною смерті. Хоча представляють 2-4% від злоякісних новоутворень на Заході, цей рак припадає майже 40% всіх випадків раку в індійському субконтиненті[1]. Ключовим фактором у відсутність поліпшень у прогнозі протягом багатьох років є те, що значну частку усних плоскоклітинний рак (ККОН) не діагноз або лікування до досягнення ними просунутій стадії. Цей діагностичний затримка може бути викликана або пацієнти (хто не може повідомити про незвичайну усній функції) або медичних працівників (які не може розслідувати спостерігається ураження грунтовно), і передбачається, що такі затримки є більше часу безсимптомного поразки. Прогноз для пацієнтів з ККОН тобто лікування на ранній стадії набагато краще, з 5-річна виживаність досягає 80%. Крім того, якість життя поліпшується після лікування на ранній стадії, тому що лікування може бути досягнуто з менш складними і менш агресивне лікування, ніж це необхідно для просунутих поразок.

Значна частина усних плоскоклітинний рак рак (ККОН) розвивається з передракових уражень, таких як лейкоплакія і усні підслизовий фіброз (рис. 1). Додатки для виявлення пошкоджень і вибір майданчиків біопсії включають прижиттєвого фарбування тканин (толуїдиновим синім рис.2) та ексфоліативний цитології. На жаль, чутливість цитологічного діагнозу в мета-аналіз 1306 випадків з 14 досліджень показав, в середньому лише 87,4% (у діапазоні від 73,8 до 100%)[2]. Гістологічне дослідження тканини залишається золотим стандартом для діагностики та виявлення злоякісного ураження ротової порожнини. Біопсія є інвазивної техніки з хірургічним наслідків, техніка обмежень для професіоналів і психологічні наслідки для більшості пацієнтів. У ньому також представлені обмеження при ураженнях великі і в цих випадках важливо, щоб вибрати найбільш гідного місця біопсії. Крім того, хоча дослідження біопсії є фундаментальним, це діагностичний метод з обмеженою чутливості, де одним з найбільш важливих особливостей є суб'єктивної інтерпретації вивчення патологоанатомом. Ці питання підкреслюють важливість відкриття і розробки нових методів діагностики, поліпшення існуючих і відкриття нових цілей терапії для прийому всередину пухлинних захворювань[3 - 6]. В останні десятиліття ми стали свідками різкого переходу від гістопатологічні до молекулярних методів діагностики захворювань та ексфоліативний цитології придбала значимість швидкий і простий метод отримання зразків ДНК. Зміни відбуваються на молекулярному рівні, перш ніж вони видно під мікроскопом і до появи клінічних змін. Ідентифікація з високим ступенем ризику усній передракових уражень і втручання в передракових етапах може являти собою один з ключів до зниження смертності, захворюваності і витрат на лікування пов'язаних з ККОН. Крім того, деякі пацієнти, як відомо, з високим ризиком розвитку раку голови і шиї, зокрема, тих, хто використовує тютюн чи алкоголь, і тих, хто старше 45 років. Такі пацієнти можуть пройти обстеження на медичний огляд, і на ранній стадії хвороби, якщо він виявлений, виліковний. Так само, як візуальний огляд шийки матки було показано, що ненадійним засобом виявлення передраку і раку, клінічний огляд порожнини рота, як було показано в рівній мірі ненадійними у визначенні попередник пошкодження і раннього раку.[7, 8]. У недавньому дослідженні 647 поразок інтерпретується академіків бути нешкідливою на клінічному обстеженні, 29 (4,5%) було підтверджено, що дисплазія або карцинома[9].

Цитологічні методи

Усні кисті біопсії

Усні клітини можуть бути отримані різними фізичними системами вишкрібання поверхні слизової оболонки, шляхом промивання порожнини рота або навіть шляхом відбору проби слини з пацієнтів. Надійність різні інструменти, використовувані в усній ексфоліативний цитологія була розглянута в різних дослідженнях[10, 11]. Ідеальний інструмент використовується для виготовлення хорошого цитологічного мазка повинні бути простими у використанні будь-де, викликають мінімальні травми і забезпечити адекватне і репрезентативне кількість епітеліальних клітин[11]. Було показано, що кисть адекватним інструментом через його легкості при відборі проб і якість усного цитологічного зразка (рис.3). Кисть біопсія прості, відносно недорогі, висока чутливість, без ризику методом скринінгу раку і служить в якості допомоги для клінічного обстеження (рис.6,7,8). Підвищення точності пояснюється легкість в отриманні повної трансепітеліальная стільникового зразків і оцінки мазків з системою аналізу зображень, які були адаптовані спеціально для виявлення порушень усній епітеліальних деякими дослідниками [12]. Повна товщина вибірки (позначається кровотеча точно під час процедури рис.4) має важливе значення, якщо гістоморфологічні, оцінка зібраних клітин для отримання представником висновки.Наприклад, багато диспластичних уражень вперше виявлений в базальні епітеліальні шари, і діагностичні гістоморфологічні дані можуть бути втрачені як клітини зрілою і parakeratin і кератин виробляється (рис.5). Для класичного застосування усній цитологічних досліджень, таких як кандидоз порожнини рота, інші були додані, такі, як вивчення епітелію інфекція, викликана вірусом Епштейна-Барр в усній поразок волохата лейкоплакія, розширюючи її можливості[13]. Важливість кисті біопсія була недавно підкреслена в багатоцентрове дослідження, в якому майже на 5% клінічно доброякісні-з'являтися пошкодження слизової оболонки були відібрані за допомогою цієї техніки, а пізніше підтверджений типовою скальпель біопсії представляти диспластичні зміни епітелію або інвазивного раку.[18] Інші автори також продемонстрували здатність кисті біопсію, щоб розкрити подібних поразок типу, які не були клінічно підозрілих на рак або хвороба преінвазивний [14]. Є протиріччя, пов'язані з реальної вартості цієї техніки в ранній діагностиці ККОН. Наявність помилкових спрацьовувань було зазначено показує високу чутливість (90%) і низькою специфічністю (3%)[15]. Тим не менше, ці дані були обговорені раніше[16]. У недавньому дослідженні Поттер і співавт., Чотири неправдивих негативів загальний аналіз 115 випадків виявлено не було. Хоча число хибнопозитивних випадків мало важливо підкреслити, що середній час затримки в діагностиці раку в цих випадках була 117,25 днів[17]. Однак, більш незалежних досліджень аналізу його справжнє валідності і надійності, а також її застосовності і її порівняння з іншими методами є необхідними. Численні дослідження з різними результатами були проведені, аналіз застосування цитології в виявлення диспластичних уражень. У дослідженні, проведеному в Судані, усні шкребти цитологічного аналізу мазка був запропонований в якості корисної ранньої діагностики методом епітеліальної атипії і, отже, і для злоякісного ураження ротової порожнини[18]. Незважаючи на покращення в методах, використовуваних для збору усних цитологічного матеріалу ця методика до цих пір створює проблеми в діагностиці раку порожнини рота. Проблеми в основному через наявність помилкових негативів, отриманих в результаті, не репрезентативна вибірка, а також суб'єктивність оцінки цитологічного[19].

Рідинна цитологія

З рідкої основі цитологія була розроблена в 1990-х років різні порівняльні дослідження показали, що вона може запропонувати значні переваги в порівнянні зі звичайними ексфоліативний цитології. Результати, отримані з матки обстеження шийки матки, наприклад, показали, що рідкі препарати на основі зменшити проблеми, пов'язані з помилкою вибірки, погані передачі і фіксації зразків стільникових[20 - 24]. У шийки матки Скринінг раку, рідких препаратів на основі також продемонстрували значне зниження помилково-негативні темпи в порівнянні зі звичайних мазках[20 - 23, 25]. У недавньому дослідженні, з Бразилії[26] рідина препаратів на основі призвело до більш високим зразком резолюції, а також подання краще цитологічних морфології для пухирчатка звичайна, плоскоклітинний рак, HSV поразках і грибкових інфекцій. Для поразки ВПГ, зокрема, спостереження cytopathological функцій свідчить про вірусних інфекцій (binucleation, багатоядерні клітини) значно покращилася з рідкою основі техніки[26].

Застосування методів

Відповідь на променеву терапію

Променева терапія часто використовується як стандартне лікування місцево-поширеного раку порожнини рота. Хоча відповідь злоякісних пухлин і навколишні нормальні тканини різних доз іонізуючого випромінювання, як правило, передбачувані, мінливість в хост-пухлини реакція конкретної людини робить відповідь непередбачувані. Цитологічні оцінки послідовного усного мазків під час променевої терапії являє собою унікальну можливість для вивчення випромінювання відповідь усних злоякісних пухлин. Раніше повідомлялося описали різні цитоплазматичні та ядерні зміни в різних злоякісних клітин оцінюється цитології після променевої терапії і включали стільниковий розширення, вакуолізація, цитоплазматичні грануляції, ядерні розширення, пікноз, karyorrhexis, каріолізис, multinucleation, micronucleation, ядерної бутонізації та binucleation (Мал.. 9,10). Пізніше micronucleation був прийнятий в якості надійного індикатора для моніторингу ефективності хіміопрофілактики проти раку і для контролю токсичності хімічних речовин. У дослідженні автор порівняння пост-радіаційних змін в нормальних і злоякісних клітинах усні було встановлено, що різні морфологічні порушення продемонстрував послідовну значне збільшення з дози опромінення[27].

Апоптозу клітини

У мазках пацієнтів для ККОН, відсоток апоптотичних клітин вивчався [28]. Це виявлення може бути вельми корисним для моніторингу реакції пацієнтів на хіміотерапію.

Cytomorphometry

Огден і співавт. [29] припустив, що кількісні методи, засновані на оцінці параметрів, таких як ядерна область (NA), цитоплазматичні область (CA), і ядра до цитоплазми співвідношення площ (NA / CA), може підвищити чутливість цитологічного для ексфоліативний ранньої діагностики ракових захворювань порожнини рота, тому що ці методи є точними, об'єктивними і відтворюваними. Cowpe і співавт.[30] показав, що ексфоліативний цитології здатний виявляти злоякісні зміни, шляхом оцінки NA / CA використанням планиметр метод Папаніколау, пофарбованих мазках. Це дослідження, опубліковане в 1985 році, зроблено висновок, що 50 клітини досить, щоб забезпечити вказівку злоякісні зміни. З тих пір кількість досліджень було проведено за методикою, описаної авторами для оцінки впливу різних системних і зовнішніх факторів на Na, Ca і NA / CA. У цих дослідженнях planimeters були замінені на напівавтоматичні методи аналізу зображень, які швидше, точніше і більше відтворюваним[31, 32]. Cowpe і співавт.[33] виявили, що тканини проходять злоякісної трансформації зазвичай показують зниження в країнах Центральної Азії до скорочення в АН.Вони також припустили, що зразки здорової слизової від того ж пацієнта забезпечують кращий контроль. Ramaesh і співавт.[34] використовували cytomorphometric методики оцінки ядерної діаметра (НД) і цитоплазматичних діаметра (CD) в нормальної слизової оболонки порожнини рота, в диспластичних уражень і в плоскоклітинний рак. Вони виявили, що диск був найвищим у нормальної слизової оболонки, нижче в диспластичних уражень, а найнижчий в СГВ. На відміну від цього, Н. Д. був найнижчим в нормальної слизової оболонки, вище в диспластичних уражень, а найвищий в СГВ. Ці дослідження свідчать про те, що зменшення розміру ядра і цитоплазми, збільшення розміру корисні ранні ознаки злоякісної трансформації, і, отже, ексфоліативний цитологія має цінність для моніторингу клінічно підозрюваний поразок і для раннього виявлення злоякісних новоутворень.

Ядерна вміст ДНК і ДНК-цитометрии зображення

Статичні цитометрии дозволяє кількісну оцінку вмісту ДНК в клітинах, отриманих від ексфоліативний цитології. Однак поточний гематоксилін-еозином фарбування є недостатнім для цієї мети, а також спеціальні методи, необхідні для забезпечення того, щоб інтенсивність фарбування пропорційна змісту ДНК. Реакція Фельгена відповідає цьому критерію, так як стехіометричні процедури: іншими словами, кожен фіксованого молекули реагенту Шиффа відповідає постійної і прирівняних до частини молекули ДНК. Перевага цієї процедури є те, що фарбування інтенсивності (і, отже, зміст ДНК) може бути визначений автоматично спектрофотометрично або денситометрія, а також цифрового аналізу зображень[35].

Використання цитологічного і ДНК-цитометрии зображення, легко довести, що поразки ротової порожнини з діагнозом червоному плоскому лишаї та інших запальних захворювань показують, жодних підозрілих клітин. Недавній огляд літератури місцях швидкість злоякісної трансформації червоний плоский лишай, щоб плоскоклітинного раку на 0,2%[36]. Навпаки, наявність злоякісних клітин було продемонстровано в одному з 21 випадків лейкоплакія (4,76%), у всіх випадках з erythroplakia і у всіх рак плоскоклітинний рак. Мета-аналіз 2236 випадків лейкоплакія з п'яти досліджень виявив ряд злоякісної трансформації лейкоплакії від 2,2 до 17,5%. Крім того, Sciubba[37], Silverman і співавт.[38] і Mashberg і співавт.[39] підкреслював, що erythroplakia, що виникають або як ізольовані ураження або як компонент лейкоплакія (erythroleukoplakia) є маркером важкої епітеліальної дисплазії або карциноми.Насправді, 90% erythroplakia були гістологічно діагноз на місці або інвазивного раку. В одному дослідженні було показано, що чутливість цитологічної діагностики в поєднанні з ДНК-цитометрии зображення може досягати 100%, а специфічність 97,4%. Автори повідомили про випадок erythroplakia, в якому intraobserver мінливості серед чотирьох патологи призвело до діагнозів, починаючи від легкої до важкої дисплазії і через цитологічних і ДНК-цитометрии діагноз (важка дисплазія з ДНК анеуплоїдії), цей випадок був, нарешті, діагноз на ранніх цитологічних і ДНК -цитометрии діагнозу до гістологічного діагнозу[40].Remmerbach та ін повідомляють, що чутливість цитологічної діагностики в поєднанні з ДНК-цитометрії зображень склала 98,2% і специфічність 100%, в порівнянні з золотим стандартом »гістології[41]. У дослідженні, Maraki і співавт. проаналізували 150 пацієнтів з гістологічно доведений епітеліальних дисплазії 36 з яких розроблені плоскоклітинний рак. ДНК-цитометрии показав ДНК-диплоїдного у 105 пацієнтів. 20 пацієнтів мали ДНК-поліплоїдії і у 25 пацієнтів ДНК-анеуплоїдії був знайдений під час початкового діагнозу. Карцинома розроблені тільки в трьох з 105 поразок диплоїдного порівняно з 21 з 25 анеуплоїдних поразок. Remmerbach і співавт.[42] дійшли висновку в клінічних умовах, що ДНК-анеуплоїдії може виявити гістологічно очевидна згубність, 1-15 місяців до гістології. Sudbo і співавт. проаналізовані архівні матеріали і повідомив, що ядерна ДНК-контенту в клітинах усній лейкоплакії можуть бути використані для прогнозування ризику усній епітеліальні дисплазії до 5 років, перш ніж гістологічного діагнозу[43]. Грунтуючись на цих спостереженнях, вони запропонували кисть біопсії з цитологічним / ДНК-цитометрии іспит на мікроскопічні оцінки білі або червоні плями порожнини рота (лейкоплакія або erythroplakia).Виявлення пухлинних клітин або ДНК-анеуплоїдії повинно призвести до повного висічення відповідних поразок і гістологічного дослідження.

Молекулярний аналіз

У той час як класичні усній цитологічного оцінки є трудомістким і вимагає високого ступеня компетентності для визначення та оцінки клітини з підозрілою морфології аналіз молекулярних змін об'єктивних і намагається визначити конкретні генетичні аномалії [6].Можливість отримання ДНК з клітин, отриманих шляхом зіскрібка Нещодавно було продемонстровано підкреслюючи його корисність в ранньої діагностики передракових усній, так і ракових поразок[44].

1. Генна зміни

В даний час злоякісні розглядається як процес, викликаний накопиченням кілька генетичних змін, що впливають на клітинний цикл, а також нормального диференціювання клітин. Ці зміни в основному придбаних (соматичних), хоча деякі з них можуть бути успадковані, а коли вони активують протоонкогенів, інактивацію генів супресорів пухлин або впливають на ферменти, які репарації ДНК, вони можуть привести до злоякісної трансформації. Більшість з ротової порожнини канцерогени хімічного (тютюн), фізичні (випромінювання) та інфекційні (Вірус папіломи людини, Candida) мутагенних факторів, які можуть викликати зміни в генної та хромосомної структури шляхом точкових мутацій, видалення, вставки і перестановок. Тим не менш, деякі з цих змін може відбутися спонтанно. Ці генетичні зміни, які відбуваються при канцерогенезі, можуть бути використані в якості мішеней для виявлення пухлинних клітин в клінічних зразках[4, 6, 45]. Молекулярний аналіз може виявити клонального популяції ракових клітин. Мутації в гені р53 супресорів пухлини є найбільш частими генетичними змінами раку у людини і показати змінною частотою в рак ротової порожнини[46]. Деякі автори вивчили і в ряді випадків продемонстрували потенціал клінічного застосування усній цитології для виявлення точкових мутацій в р53, як конкретні пухлинних маркерів в ККОН[45, 47 - 49]. Однак, інші автори вважають, що велика кількість точкових мутацій, які можуть бути знайдені в р53, обмеження потенційного клінічного застосування в економічно ефективної ранньої діагностики раку порожнини рота[50].

2. Епігенетичних змін, втрата hetrozygosity і мікросупутника нестабільності

Застосовності інших молекулярних маркерів, таких як епігенетичні зміни (гіперметілірованіе промоутер регіонів) і нестабільність генома, такі як втрата hetrozygosity (LOH) і мікросупутник нестабільності (MSI) була також вивчена. [50, 51]. Основний епігенетичні зміни в пухлинах метилирование і здається, що зміни до метилування може відігравати важливу роль у розвитку пухлин. Ці епігенетичні зміни найчастіше пов'язані з втратою експресії генів і їх поява, схоже, необхідних для декількох необхідних генетичних подій. Так злоякісної прогресії відбувається тому, що ці зміни можуть інактивувати ДНК ремонту генів. Росас і співавт. вивчали метилирование моделі p16, MGMT і DAP-K генів в мазках хворих, що страждають раком голови і шиї[50]. Вони виявлені аномальні гіперметілірованіе в обох видах зразків метилювання конкретних полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР). Вони припустили, що цей метод дозволяє чутливою і ефективне виявлення пухлинних ДНК, і це потенційно корисним для виявлення і контролю рецидивів у цих пацієнтів. Втрата неоднорідності (LOH) та інші молекулярні зміни вказують на усні канцерогенез можуть бути чітко встановлені в спученого клітини[52 - 54]. Huang і співавт.[55], використовуючи методи ПЛР для ампліфікації ДНК із зразків спученого цитології від орального раку, для аналізу Restriction-довжини фрагмента поліморфізми (RFLPs). Вони виявили, що 66% пухлин вивчав показав LOH на одну позицію в послідовності р53, а 55% показали LOH в іншому місці. ПЛР та ПДРФ-аналізу були також використані для виявлення мікросателітних маркерів, тобто короткі повторювані послідовності ДНК. Мікросупутник мутацій, LOH або нестабільність (MI) усі характеристики плоскоклітинний рак голови і шиї, і таким чином можуть бути використані в якості молекулярних маркерів злоякісності. Мікросупутник регіонами розподілені по геному і широко й успішно використовуватися в якості молекулярних маркерів для канцерогенезу. Зміни в цих регіонах були використані в якості маркерів і клонального для виявлення пухлинних клітин серед нормальних клітин[56, 57]. Кілька досліджень показали, цим за допомогою мікросателітних маркерів, що зміни до деяких регіонах хромосом 3p, 9p, 17p і 18q, пов'язаних з розвитком голови і шиї, рак плоскоклітинний рак[58, 59].Нуньєс і співавт.[60], виконаних мікросупутник аналізу клітин взятих з ротової порожнини порожнини рота і ротоглотки хворих раком ексфоліативний цитології і рідина для полоскання рота, знаходячи LOH в 84% проб, хоча і з відмінностями в залежності від стадії пухлини. Ці автори припустили, що методи цього типу може бути корисним для ранньої діагностики та для моніторингу стану пацієнта. В іншому дослідженні, Спаффорд і співавт. визначені генетичні зміни (LOH або ІМ) у всіх злоякісних пухлин порожнини рота, включених до їх вибірці. [6] З іншого боку, жоден з їхніх здорових пацієнтів показали такі зміни, що вказує на дуже високу специфічність цих методів.

3. Вірусні дослідження генома

Архівні слайди цитології також може бути використаний для виявлення ДНК ВПЛ з ISH.Діагностика метастазів звичайно визначається тонкоголкової аспірації. Вірус папіломи людини (ВПЛ) в даний час розглядається в якості збудника в підмножина HNSCC (FF).Наявність ДНК ВПЛ шляхом у гібридизація (МІГ) в метастатичних поразок від HNSCC використанням спиртових, архівні, cytopathological матеріалу; було вивчено і цитологічні особливості HPV-позитивного метастатичного ураження HNSCC характеризувалися; та ВПЛ ДНК і походження метастатичних поразок корелює[61]

Індекс 4.Proliferation і AgNOR аналіз

Ки 67 був вивчений в усній цитологічні мазки використанням Іммуноцітохіміческая оцінити характер ураження та реакції на лікування. Шарма та ін, оцінюється Ki-67 в цитологічних подряпини від усних плоскоклітинний рак до і після 24 Сірий променевої терапії у 43 пацієнтів. Ki-67 вираз був помічений у вкрай невелике число клітин. Тільки 10 пухлин показали позитивні клітини, і індекс мітки в них варіювалися від 0,1% до 0,01%. Після 24 Сірий опромінення, жодного випадку показав, Ki-67 позитивних клітин[62]. Дійсність усних цитології для аналізу числа keratinised клітин і ядерець діяльності (AgNORs) в пацієнтів, що палять була нещодавно продемонстрована [63]. Remmerbach повідомив про AgNOR аналізу в усній цитології і прийшли до висновку, що це може бути використана в якості рутинного методу діагностики раку порожнини рота[64].

5. Імуногістохімічне визначення пухлинних маркерів

Визначення пухлинних маркерів, зокрема, цитокератини в мазках з порожнини рота викликає жвавий інтерес. Цитокератин вираз профілю містить корисну інформацію про статус осередку диференціації[64], але її потенціал для ранньої діагностики раку порожнини рота обмежено[66]. Однак деякі цитокератини, таких як K8 і K19 є корисними, якщо не остаточні показники злоякісні пухлини, особливо, якщо їх присутність інтерпретується в поєднанні з іншою інформацією, наприклад, профіль ДНК[67, 68].

Висновок

Усні цитології стає все більш важливу роль у ранній діагностиці ракових захворювань порожнини рота, оскільки процедура отримання комірки зразки, які потім можуть бути проаналізовані складні діагностичні методи, такі як cytomorphometry, ДНК-цитометрії, і молекулярні аналізи. Поява таких методів, як синє забарвлення толуидин, кисть біопсії і застосуванні складних комп'ютерних програм змінився сценарій і зробив інтерпретації результатів набагато надійнішими. ніж раніше. Цитологічне дослідження усній клітини порожнини є простим і швидким, неагресивних і відносно безболісно: він так добре приймаються пацієнтами і підходить для повсякденного застосування в програмах скринінгу населення, для раннього аналізу підозрілих ушкоджень, так і для перед-і пост- моніторингу лікування підтверджених злоякісних поразок.

Посилання

1. Вікові показники захворюваності та патологічної спектра або раку порожнини рота в Аллахабаді.

   Ind J Med Науково 2003, 57 : 400-4.

2. Використання цитології ексфоліативний для ранньої діагностики ракових захворювань порожнини рота: чи є для неї роль в освіті та приватної практики?

   J Рак Educ 1998, 13 :. 85-9

3. Прогрес у діагностиці передракових усні та злоякісних новоутворень.

   Може J Dent 2002, 68 : 617-21.

4. Виявлення зміни поля в рак ротової порожнини за допомогою пероральних ексфоліативний цитологічне дослідження.

   Рак 1991, 68 :. 1611-5

5. Генетичної гетерогенності в слині пацієнтів з усною рак плоскоклітинний: наслідки в молекулярної діагностики і скринінгу.

   J Мовляв Diagn 2001, 3 :. 164-70

6. Виявлення голови і шиї, плоскоклітинний рак серед спученого слизової оболонки порожнини клітин мікросупутник аналізу.

   Clin Cancer Res 2001, 7 :. 607 |

7. Оцінка візуального огляду, як скринінг-тест для раку шийки матки.

   Br J Рак 1997, 75 : 436-440.

8. Кисть біопсії в ранній діагностиці уражень м'яких усні тканини. У Тютюн Лічильники охорони здоров'я. Том III. Під редакцією А. К. Верма. Нью-Делі: Macmillan; 2004:216-19.

9. Поліпшення виявлення передракових та ракових поразки ротової порожнини. Комп'ютерний аналіз усних кисті біопсії.

   JAM Дент доц 1999, 130 : 1145-57.

10. Зелений М: цітощеточка і дерев'яна лопаточка для перорального ексфоліативний цитології. Порівняння.

    Acta Cytol 1992, 36 :. 706-10

11. Цітощеточка Плюс колекторних камеру в усній цитології.

    Усні Surg Усні Med Усні Pathol 1994, 77 :. 95-9

12. Свірський Ю.А.,: Комп'ютерний аналіз усних кисті біопсії.

    Compend Контіні Educ Дент 2001, 22 : 99-106.

13. Стінові Д.М. Неінвазивна методика для вивчення усного епітелію вірусом Епштейна-Барр вірусної інфекції та хвороби.

    Усні Oncol 2003, 39 :. 436-44

14. Ексфоліативний цитологічне обстеження в ранній діагностиці раку порожнини рота.

    Int J Dent 1976 р., 26 : 398-404.

15. Усні кисті біопсії: проблема помилкових спрацьовувань.

    Усні Surg Усні Med Усні Pathol Усні Radiol Endod 2003, 96 :. 252

16. Усні кисті біопсії: відділення факти від вигадки.

    Усні Surg Усні Med Усні Pathol Усні Radiol Endod 2003, 96 :. 654-6

17. Усні злоякісних новоутворень пов'язані з негативними трансепітеліальная кисті біопсії.

    J Усні Maxillofac Surg 2003, 61 :. 674-7

18. Вивчення усної епітеліальної атипії серед користувачів суданській тютюну ексфоліативний цитології.

    Протиракових Res 2003, 23 : 1943-9.

19. Interobserver мінливості в інтерпретації кисті дослідження цитологічного з голови і шиї поразок.

    Arch Otolaryngol Глава Шия Surg 1991, 117 :. 1350-5

20. Хусейн М, Хауелл Л.П., Макінтош K, та ін:.Багатоцентрове масках оцінки AutoCyte Prep тонкими шарами з matchedconventional мазків, в тому числі перші результати біопсії.

    Acta Cytol 1998, 42 :. 189-97

21. Макгуган Е, Рейт: Чи буде моношарів забезпечити більш репрезентативних вибірок і поліпшення підготовки шийки матки? - Огляд та оцінка систем доступні.

    Acta Cytol 1996, 40 :. 107-19

22. Ефективність монослоя підготовки до цитології шийки матки акцент на неоптимальних зразків.

    Acta Cytol 1996, 40 :. 496-500

23. AutoCyte система підготовки до гінекологічної цитології.

    Acta Cytol 1998, 42 :. 171-7

24. Стандартизація приготування зразків через моно / тонкошарової технології. У Automatedcervical скринінгу раку. Під редакцією Grohs HK, Хусейн OAN. Нью-Йорк: Igaku Сеин; 1994:176-85.

25. Хибно негативні ставки в цитології шийки матки.

    Acta Cytol 1996, 40 :. 81-9

26. Рідкі препарати на основі порівняно зі звичайними цитологія: адекватність зразка та діагностичні угоду в усній поразок.

    Усні медицини та патології 2005, 23 (9) : 1927-33.

27. Мехротра Мадхур, Сінгх М: Послідовний цитологічного мазка шкребти випромінювання відповідь у нормальних і злоякісних клітин порожнини рота.

    Індійський J Pathol Microbiol 2004, 47 :. 497-502

28. Виявлення апоптотичних клітин в цілісній слині patiens з усними передракових і злоякісних поразок: попереднє дослідження.

    Усні Surg Усні Med Усні Pathol Усні Radiol Endod 2004, 97 :. 465-70 <

29. Усні ексфоліативний цитологічного дослідження: огляд методів оцінки.

    J Усні Pathol Med 1997, 26 : 201-5.

30. Кількісні ексфоліативний cytologyof нормальні усні squames: вік, місце і секс пов'язані обстеження.

    JR Soc Med 1985, 78 :. 995-1004

31. Кількісна цитологія усні мазки-порівняння двох методів вимірювань.

    Аналіт Квант Cytol Histol 1991, 13 : 11-5.

32. Порівняння аналізу планіметрії і зображення для розрізнення нормальних і аномальних клітин у цитологічних мазках підозрілих поразок порожнини рота.

    Cytopathol 1993, 4 : 27-36.

33. Зелений МВт: Кількісна цитологія ексфоліативний аномальних мазків слизової ротової порожнини.

    JR Soc Med 1988, 81 :. 509-13 | <

34. Cytomorphotometric аналіз squames отримана з нормальної слизової оболонки порожнини рота і поразки усній лейкоплакії і плоскоклітинний рак.

    J Усні Pathol Med 1998, 27 : 83-6.

35. Гарсія дель Мораль Histoquímica де proteínas, aminas biógenas у ácidos nucleicos. У Laboratorio де anatomía patológica. Під редакцією Гарсія дель Мораль Р. Мадрид: McGraw-Hill - Interamericana Іспанії; 1993:245-63.

36. Всебічний огляд раку порожнини рота.

    Дружині Дент 2001, 49 : 72-82.

37. Поліпшення виявлення передракових та ракових поразки ротової порожнини. Комп'ютерний аналіз усних кисті біопсії.

    JADA 1999, 130 :. 1445-57

38. M Горський: Епідеміологічні і демографічні оновлення раку порожнини рота: Каліфорнія і національних даних - з 1973 по 1985 рік.

    JADA 1990, 120 :. 495-9

39. Клінічні критерії для виявлення ранніх усних та ротоглотки раку: erythroplasia повернутися.

    Am J Surg 1988 р., 156 : 273-5.

40. Цитологічна і ДНК-цитометрии дуже ранньої діагностики раку порожнини рота.

    J Усні Pathol Med 2004, 33 :. 398-404

41. Цитологічного і ДНК-цитометрии ранній діагностиці раку порожнини рота.

    Анальний стільниковий Pathol 2001, 22 : 211-21.

42. Найстаріші виявлення раку порожнини рота з використанням неінвазивних кисті біопсії в тому числі ДНК-цитометрии зображення: доповідь про чотирьох випадках.

    Анальний стільниковий Pathol 2003, 25 : 159-66.

43. Вміст ДНК в якості прогностичного маркера у хворих з усним лейкоплакія.

    N Engl J Med 2001, 344 : 1270-8.

44. Пател К, Видобуток РНК з усних біопсії в усній лейкоплакія.

    Гаваї: вісімдесят другого IADR Конгрес 2004, 1240.

45. Бойл Ю.О., Бреннан Дж. А., Sidransky D:генні мутації в слині в якості молекулярних маркерів для голови і шиї, рак плоскоклітинний рак.

    Am J Surg 1994, 168 :. 429-32 |

46. Вільямс Хейккі Ковалайнен: Молекулярна патогенезі плоскоклітинного раку усні.

    J Clin Pathol: Мовляв Pathol 2000, 53 : 165-72.

47. Лопес М, та ін:.Використання цитологічних зразків для зміни гена p53 виявлення в усних плоскоклітинний рак пацієнтів рак ризик.

    Clin Oncol 2004 року в пресі.

48. Мутація гена р53 кодон 63 в слині як молекулярний маркер для перорального плоскоклітинний рак.

    Усні Oncol 2000, 36 :. 272-6 |

49. Виявлення TP53-мутації в кисті біопсії з усних лейкоплакій.

    Mund Кіфер Gesichtschir 2002, 6 :. 410-4 |

50. Промоутер гіперметілірованіе моделі p16, О6-метілгуанін-ДНК-метилтрансферази, і смерть пов'язаних протеїнкінази в пухлинах і слини голови і пацієнтів шиї.

    Cancer Res 2001, 61 :. 939-42 |

51. Лопес М, та ін:. промотора гена гіперметілірованіе в усній полоскання лейкоплакії пацієнтів - діагностичні та / або прогностичний інструмент?

    Eur J Рак 2003, 39 :. 2306-9 |

52. Використання алельних втрат передбачити ризик злоякісних низькосортних усній епітеліальні дисплазії.

    Clin Cancer Res 2000, 6 :. 357-62

53. Часті зміни в хромосомі мікросупутник 9p21 і 3p14 в усній передракових уражень і їх значення в оцінці ризику раку.

    Nat Med 1996, 2 :. 682-5

54. Партридж Філліпс Е, емільон Г.Г. Ленгдон Джонні Депп: випадок-контроль дослідження підтверджує, що мікросупутник аналіз може виявити пацієнтів з ризиком розвитку плоскоклітинного раку в поле cancerization.

    Cancer Res 2000, 60 :. 3893-8

55. Втрата гетерозиготності гена р53 раку порожнини рота виявлені ексфоліативний цитології.

    Усні Oncol 1999, 35 :. 296-301

56. Мікросупутник зміни як клонального маркерів у виявленні раку у людини.

    Праці Natl Изд-во АН США 1994, 91 :. 9871-5

57. Молекулярні маркери в діагностиці раку.

    J Natl Рак Inst Monogr 1995, 17 :. 27-9

58. Послідовна втрата гетерозиготності на мікросупутник мотиви в преінвазивний і інвазивного раку голови і шиї плоскоклітинна.

    Cancer Res 1995, 55 :. 2656-9

59. Генетичні моделі прогресії раку голови і шиї: наслідки для польових cancerization.

    Cancer Res 1996, 56 :. 2488-92

60. Нуньєс Д.М.: Виявлення усні та ротоглотки раку microsatelite аналізу в рот миє і поразок щіткою.

    OralOncol 2000, 36 : 525.

61. Прав виявлення геному вірусу папіломи на місці шляхом гібридизації в тонкоголкової аспіраційної метастатичного ураження від голови і шиї, рак плоскоклітинний рак.

    Рак. 2005

62. Шарма P, Бахадур А.К., Мандал А.К.: Ki-67 в цитологічних подряпини від усних плоскоклітинний рак до і після 24-сірого променевої терапії дослідження на 43 пацієнтах.

    Мед Усні Патол Усні Cir Bucal 2005, 1 (10 Дод. 1) : E15-7.

63. Орельяна-Бустос А.І., Еспіноса-Сантандер І.Л., франко-Мартінес, Лобос-Джеймс, Ортега-і-Пінто А.В.: Оцінка зроговіння і AgNORs розраховувати в ексфоліативний цитології нормальної слизової оболонки порожнини рота від курців і некурців.

    Мед Усні 2004, 9 :. 197-203

64. Діагностичне значення ядришкообразующіх районів (AgNORs) в кисть біопсії підозрілих поразок порожнини рота.

    Анальний стільниковий Pathol 2003, 25 : 139-46.

65. Лейн Е.Б., Олександр CM: Використання кератину антитіл у пухлину діагнозу.

    Семінар Біології Рака 1990, 1 : 165-7.

66. Цитокератин вираз в рак ротової порожнини та її зв'язок з пухлиною диференціації.

    J Усні Pathol Me 1993, 22 : 82-6.

67. Кератин профілі нормальних і злоякісних слизової оболонки порожнини рота використанням ексфоліативний цитології.

    J Clin Pathol 1993, 46 :. 352-6

68. ДНК і кератином аналіз усних ексфоліативний цитології у виявленні раку порожнини рота.

    Усні Oncol, Eur J Рак 1994, 30B :. 405-8