Back to site
Since 2004, our University project has become the Internet's most widespread web hosting directory. Here we like to talk a lot about web development, networking and server security. It is, after all, our expertise. To make things better we've launched this science section with the free access to educational resources and important scientific material translated to different languages.

Melilotus

Original on http://digitalcommons.unl.edu/cgi/viewcontent.cgi?article=1255&context=agronomyfacpub Agronoomia ja aianduse osakonna Agronoomia - Ülikooli väljaanded University of Nebraska - Lincoln Aastal 1961 Ümberhindamine suhte vaba ja Bound kumariinitootja Melilotus University of Nebraska - Lincoln, fhaskins@neb.rr.com United States Department of Agriculture See raamat on postitatud DigitalCommons @ University of Nebraska - Lincoln. http://digitalcommons.unl.edu/agronomyfacpub/255 Avaldatud Crop Science (september-oktoober 1961) v.1, no. 5 Crop Science Kumariinitootja Melilotus 1 FA Haskins ja HJ Gorz- D UNCAN ja prügivedaja (3, 4), Clayton ja Larmour (1), Stevenson ja Clayton (13), olid esimesed uurijad püüda testis kumariinitootja sweetclover {Melilotus spp.). Kõik need töötajad ilmselt arvas, et kumariini mõõdetakse nende proovivõtmismeetodid olemas vaba vorm taim. Roberts ja Link (8, 9) tunnustatud juuresolekul seotud kumariinitootja sweetclover seemned ja rohelised kudedesse ning märkis, et tuleb näha ette hüdrolüüsi seda vormi, kui usaldusväärsed väärtused kogu kumariini sisu oleks saadud. Samas märkisid nad, et mahlakas, rohelise kudede vabas vormis tavaliselt ülekaalus üle seotud kujul (9). Slatensek ja Washburn (12) märkis, et Pioneer sweetclover, erinevaid kirjeldatud Stevenson ja valge (14) nagu oleks väike kumariini põhjal kolorimeetrilisi analüüsi alkohoolsete ekstraktid, tundus olevat kõrge kumariini kui analüüsitakse poolt fluorometric meetod, mis on seotud kütte taime koe leelist. Väärtuste erinevus saadud kaks meetodit omistati juuresolekul seotud kumariini mis hüdrolüüsub fluorometric korras, kuid mitte kolorimeetrilisi testis. Kuigi fluorometric testis kirjeldatud Slatensek ja Washburn (12) ei võimalda eristada vaba ja seotud kumariin, mis on ilmne, et need uurijad peetakse kumariini olla vabas vormis kõigis kumariini sisaldavaid muud sordid peale Pioneer. Viimastel aastatel Goplen et al. (5) on teatanud mõju kohta kaks paari alleele, Cu / Cu ja B / b korral ulatus ja vorm on kumariinitootja sweetclover. Kvalitatiivne kolorimeetrilisi meetodit kasutati avastamiseks vaba kumariini alkohoolsete ekstraktid; ja kvantitatiivsete mõõtmiste kõigist kumariin, fluorometric testis sarnane kirjeldatud Slatensek ja Washburn (12) kasutati. Autorid järeldasid, et Cu / cu allelic paar reguleerivad olemasolu või puudumine kumariin ja et B / b alleelide kindlaks tüüpi kumariin (tasuta või seotud) kohal Си üksikisikud. Proovivõtmismeetodid ei võimaldanud määra- 1 Cooperative uurimise kultuurid Research Division, ARS. USDA ja Nebraska Agricultural Experiment Station. Research toetas osaliselt Riiklik Teadusfond (grant nr G13182). Avaldatud kooskõlastatult direktori raamatu nr 1091. Journal Series. Nebraska Agr. Exp. Sta. "" Professor agronoomia, University of Nebraska, ja geneetik. Kultuurid Research Division võrra. Tehnilist abi Larry Williams ja Walter Akeson on tänulikult tunnistanud. ritud vaba kumariini tase, kuid see võib järeldada nende arutelu, et autorid pidasid kumariini kohal CuCuBB taime kudedes olla vabas vormis. Haskins ja Gorz (6) kasutada muutmine Slatensek ja Washburn (12) määramise kord Vaba ja kogu kumariinitootja vesilahused ot taime koed esindavad nelja genotüüpide homosügootne suhtes Cu / Cu ja B / b. Nende järelduste seoses mõju need kaks paari alleele erinesid mõnevõrra järeldusi Goplen et al. (5). Seega, soovitasid nad, et Cu / cu alleelide kindlaks teha, kas tase kumariini oleks kõrge või madal, ja B / b alleele mõjutanud juuresolekul vaba ja seotud kumariini erinevalt seotud kumariini ainult. Teatati, et noorte lehtede Cub fenotüüp, umbes 37 (r of kumariini oli vabas vormis. Samuti Clopton (2) on näidanud, et ligikaudu üks kolmandik kumariinitootja Hubam sweetclover seemned toimub vabas vormis. Veel hiljuti Rudorf ja Schwarze (10) on leidnud, et kui ei võeta vajalikke ohutusabinõusid vältida glükosidaas tegevuse käigus kaevandamise, väljavõtteid "bitter" Hubam sweetclover sisaldavad vähe, kui üldse tasuta kumariini. Nad kasutasid lahjendatud väävelhappe kaevandavad lahendus, ja teatas, et seondub kumariin, mis oli eeldatavasti glükosiidide c /.ro-hydroxycinnamic acid, oli kaevandatud ilma hüdrolüüsub. Kuigi mingil täieliku ülevaate kirjandusest kumariinitootja sweetclover, toodu on piisav, et näidata, et seisukohalt kohta, millisel kujul kumariini olemas normaalne, kumariini sisaldavaid sweetclover taimed on nihkunud. Nii varakult töötajatele ilmselt arvas, et vabas vormis ülekaalus, siis usuti, et mõlemat liiki leidus suures koguses, ning viimasel on oletatud, et onlv seotud kujul olemas terve taim. Käesoleva uuringu põhjendab tulemusi Rudorf ja Schwarze (10), kuid kasutab erinevaid meetodeid kaevandamise ja testis, ja kasutab erinevate genotüüpide kaheaastase sweetclover asemel aastane sort, Hubam. Taimed iga kahe aasta tagant valge õide sweetclover (Mel / Ion,; jlba Desr.) Neljast genotüübid. CuCuBB. CuCubb. cucuBB ja cucubb. kasutati käesoleva uuringu. Taimed olid tüüpilised Avaldatud Crop Science (september-oktoober 1961) v.1, no. 5 HASKINS & GORZ: SEOS TASUTA ja siduda KUMARIIN Biennaal kollane ühise Yellm Madrid Goldtop Erector Biennaal valge ühise White Hispaania Evergreen Arctic Iga-aastane valge Iisrael Mitme F e read, mis olid saadud ühe-, kahekordselt heterosügootse taim. Algne rist, kust see F (i tehas saadud kaasatud cucuBB taime emataim ja J CuCubb taime isataim. Seemne, kust need kaks emataimedelt kasvatati saadi WK Smith, kultuurid Research Division, Põllumajanduse Research Service, US Department of Agriculture, ja University of Wisconsin. Proovid kumariini testis saadi esimese aasta taimede kasvu seemnetega valdkonnas ridadesse ilma kaaslaseks põllukultuuride kevadel i960. Kuusteist taimi iga genotüübi olid valimisse 4. oktoobril i960 ja 16 täiendavat taimi iga genotüübi olid valimisse 6. oktoobril. Iga taime prooviks võetud terminal 8 - kuni 10-tollise osa üks haru oli eemaldatud ja lõigatud ots oli kohe üleni katseklaasi kraaniveega. Proovid olid siis veetakse laborit, kus noor Täielikult avanenud leaf valiti iga filiaalid. See leht oli eemaldatud ja kolm lendlehti lõigatud rootsuga terava noa tera. Iga infoleht oli kohe kaalutakse täpsusega 0,1 lapiga. kohta otse lugemise tasakaal. Keskel Infoleht ahjus kuivatatud määramiseks protsent kuivaines. Üks pool Infoleht kukkus 2 ml. destilleeritud veega toatemperatuuril, mis sisalduvad katseklaasi. Kaks tilka 95% etüülalkoholi suhtes kohaldatud infoleht hõlbustada sukeldumisele ja katseklaasi sisu olid siis autoklaavida 15 min. umbes 15 psi. See meetod kaevandamise, määratud korras "A", on kirjeldatud varasemat avaldamist (6). Teisel pool Infoleht läbima kaevandamise kord "B", mis erines kord "", et Infoleht kukkus 2 ml. vett, mis oli kuumutatakse keeval vesivannil 10 kuni 15 min. Lisaks alkoholi ei olnud vaja sukeldumisele pakendi infolehe nendel tingimustel. Toru jäeti keevas vees umbes 10 sec. pärast infolehes oli lisatud ning seejärel lastakse seista toatemperatuuril, kuni see pandi autoklaavis. Infolehtede kavandite järgi ekstraheeritud kord "" ja "B" oli autoklaavida üheaegselt. Autoklaavitud väljavõtted olid jahtunud, lendlehti eemaldada ja hävitada ning väljavõtted olid salvestatud sügavkülmikusse hiljem testis. Analüüs meetod oli sisuliselt fluorometric kord vaba ja kogu kumariini mida kirjeldatakse Haskins ja Gorz (6). Nii kaevandamise kord, püüti vältida verevalumeid voldikuid. Operations olid kavandatud nii, et maksimaalne vahelise aja eemaldamine lehti filiaali ning lisaks infolehtede vesi oli umbes 40 min.. ja maksimaalne vahelise aja lisamine infolehed vee ja algust autoklaavimisel oli 8 min. Varasemas eksperimendis selgus, et voldikuid võiks seista kuivas torud toatemperatuuril vähemalt 6 tundi, ilma et märkimisväärselt muutuks määral vaba ja kogu kumariini. Kaevandamise kord "B" oli ka saamiseks kasutatavad väljavõtteid proovimise 5 taime iga 9. sweetclover sordid. Neli kollane õide sordi ühise Yellow, Madrid, Goldtop. ja Erector (M. offichialis (L.) Desr.) ja 5 valge õide sordi ühise White. Hispaania, Evergreen, Arctic ja Iisraeli (M. alb.i)-kasutati seda osa uuringust. Välja arvatud iga-aastane sort, Iisrael, need sordid on iga kahe aasta tagant majanduskasvu harjumus. Proovid koguti 10. oktoobril i960, alates põllul kasvatatavad taimed külvatakse ridadena ilma kaaslaseks põllukultuuride kevadel i960. Tulemused ja arutelu Keskmised väärtused tasuta ja kogu kumariinitootja "A" ja "B" väljavõtted noorte lehtede 32 põllul kasvatatavad taimed igal homosügootse genotüübiga toodud tabelis 1.. For cucuhb. cucuBB. ja CuCubb lehed, erinevad saadud tulemused kahe kaevandamise kord olid ebaolulised. Nagu oodatud, lehed cucu genotüüpide sisalduvad verv väikeses koguses kas tasuta või seotud kumariin, ja testides CuCubb ekstraktid näidatud suurtes kogustes kumariin, sisuliselt kõik, mis oli seotud kujul. Juhul CuCuBB lehed, teiselt poolt, ekstraktid saadud kord "A" sisaldab olulisi määral vaba kumariini samas kui "B" ekstraktid sisaldas vähe, kui üldse ühendi sellisel kujul. Kokku kumariini tase täheldatud kahte tüüpi väljavõte ei olnud oluliselt erinevad. Kohaldamise 2 kaevandamise kord kasvuhoone kasvatatud taimede 4 kahekordselt homosügootne genotüüpide 0. 01 i-0,001 . 02 i. 0,002 Tabel 1-keskmiste tasemete Vaba ja kogu kumariinitootja noorte lehtede alates 4. genotüüpide sweetclover. Tulemused põhinevad väljavõtted tehtud kaks korda, 32 taime iga genotüübi olid analüüsitakse.
Grnotypi " CUU m. . Iri:; r.mteiu ([» : Гсе
Pn> c L-di "" A "
Fr Täielik
im- "SE iiuMn г SE
cucubb cucuBB 0,02 + 0,01 t 0.001 0.001 (}. 0.4> 0,001о. o: <: o.ooi
CuCubb CuCuBB o.ol; 11,001 1).0,10 : S. : St -: - o.104: l. : Rahvusvahelise Ajakirjanike Föderatsiooni t o. 11 s
Tabel 2-keskmiste tasemete Vaba ja kogu kumariinitootja noorte lehtede 9 sortide sweetclover. Kord "B" oli koostamisel kasutatud ekstraktid; 5 taime iga sordi olid analüüsitakse.
Kumariini e < tahtlus (pi . ■ reentaLU ■ ot kuiv \
Vaba T Kogutulu
keskmine t-SE keskmine ± SE
0. 02 + ■ 0. 002 3. 1 s seda). 22 (i
0. 02 i0,00;; Я.02 i 0. loii
0. 0Г, * 0. 020 3.02 tO.ll; j
0. 02 * 0.001 2,84 r 0,330
0. 04-t 0.007 X36 + 0. 20 (5
0. Ofi ± 0,014 4.30 + 0.706
0,02 *- 0.002 3.72 f 0. 143
0,02 ± 0,00-1 2.4-s f 0,230
0. 02 ± 0,002 4.30 г о. ; Ш
andnud tulemusi samasuguseid kui põllul kasvatatavad materjali on kasutatud. Mingil juhul ei protseduur "B" toota sisaldava väljavõtte märgatav kogus vaba kumariini. Tulemused proovimise ekstraktid abil saadud kord "B" jätab üheksa sweetclover sordid on esitatud tabelis 2.. Asjaolu, et väga madal tasuta kumariini väärtusi täheldati kõigi nende sordid, mis kõik on Cub fenotüüp näitab, et peaaegu puudub ja vaba kumariin on pigem reegliks kui erandiks puutumata sweetclover kudedes. Lisaks eelkatsel korra "B" on kaks kumariini sisaldavaid rohi, magus kevadise muru {Anthoxanthum odoratum L.), ja magus rohi (Hierochloe odorata (L.) Beauv.) Sisuliselt kõik ühendit ei esine aastal seotud kujul. Piiratud andmete põhjal ei saa muidugi lubada üldist sõnastust, kas sarnane olukord olemas kõigis taime, millest on teatatud, et sisaldavad kumariini. Esitatud tõendid Rudorf ja Schwarze (10) ja Schaeffer 3 näitab, et kindlasti kumariini kohal sweetclover on glükosiid c / ". Ro-hydroxycinnamic hape. 4 hüdrolüüs selle ühendi poolt / 3-glükosidaasi, ensüümi teadaolevalt esinevad kudede CuCuBB genotüübi (11). saagikus mo-hydroxycinnamic hape läbib spontaanne lactonization toota vaba kumariini.Vastavalt. ilmne järeldus, mida saab teha saadud tulemuste ekstraheerimise "A" on see, et / 3-glükosidaasi vabastati osa seotud kumariini ajal ajavahemik lisamine CuCuBB infolehed vee ja inaktiveerimise / 3-glükosidaasi Autoklaavi kasutamisel. Püüdes kindlaks väljastamise aeg seotud kumariinitootja pro- 3 Schaeffer, GW Chemical geneetika kumariini metabolismi Melilotus. Unpub. Ph.D. Thesis, University of Nebraska, i960. 4 glükosiid on FTV / «jo-hydroxycinnamic hape esineb ka sweetclover kudedes (7) ja see isomeer on lisatud "kogu kumariini "arvud on saadud fluorometric korras. Kuidas kunagi, Rudorf ja Schwarze (10) teatasid, et ainult väikeses koguses trans-isomeeri, mis tavaliselt esinevad taime. Avaldatud Crop Science (september-oktoober 1961) v.1, no. 5 Crop Science Menetlusele "," CuCuBB lendlehti lisatakse vett, keda raviti väheses koguses alkoholi põhjustada üleujutust ja lastakse seista toatemperatuuril erinevatel aegadel kuni üks tund enne veest väljavõtmist ja allutamine ekstraheerimise "B." Vähe, kui üldse tasuta kumariini leiti kas infolehel väljavõtted või vette, kus lendlehti seisma enne ekstraheerimist. Ilmselt siis vabastamist tasuta kumariini märkis kord "" tekkis autoklaav eelnevalt soojuse inaktiveerimise / J-glükosidaasi selles infolehes kudedes. Võimalikku seotust alkoholi hüdrolüüsivate seotud kumariini ajal autoklaavimisel protseduuris "A" on vastuolus asjaolu, et tegevusetus alkoholi ei takistanud vabastamist tasuta kumariini. Sellest järeldub, et menetlus "B" keev vesi inaktiveeritud /?-Glükosidaasi piisavalt kiiresti, et vältida märgatav hüdrolüüsi seotud kumariini. Hüdrolüüsi seotud kumariini saab indutseerida mitu muul viisil kui kaevandamise kord "A". Seega järgmised käsitlused CuCuBB infolehed tulemusena moodustumist suurtes kogustes tasuta kumariini: mehaaniline leotamise teel; külmutamine vedela lämmastiku järgneb ülessulatamist vees, atsetoon, metüületüülketoon, metüülalkohol, 95% etüül alcolhol, n-propüül, n-butüülalkohol, etüül-eetris, etüülatsetaadis, benseeni ega kloroformis toatemperatuuril ja lühike uputamise eeltoodud orgaanilisi lahusteid järgneb vee lisamine ja autoklaavimisega. Mõnel määral hüdrolüüsi ületas 90%. Asendamine vee kord "" by Ю ^ - 1 М lahendusi glükosidaasi inhibiitoritel AgNO, HgCL,, ja CuCl 2, ei mõju täielik inhibeerimine hüdrolüüsil. Neil ja muudel kaevandamise uuringutes ravi kõige tõhusam ennetamisel hüdrolüüsi seotud kumariini olid need, mis hõlmavad sukeldumisele koe kuum maksevõimeline; ja lahustit testitud, ükski ei olnud tõhusam kui kuuma veega, mida kasutati kord "B. " Samas pärsib hüdrolüüs võib toimuda kasutada madalatel temperatuuridel, nagu on näidatud eksperimendist, kus lehed CuCuBB genotüübi olid kohapeal vedela lämmastiku uhmris misjärel külmunud maapinna materjal oli kaevandatud esmalt 100% metanooli ja ja seejärel 50% metüülalkoholi sügavkülma. Ekstraktid saadud moodustasid ligikaudu 99% kogu kumariini olemas lehed, ja oli vaba kumariini tase vaid pisut kõrgem kui täheldatakse väljavõtteid teha kord "B." Üheaegne olemasolu seotud kumariin ja / 3-glükosidaasi tervetel kudede CuCuBB genotüübi ilmselt sõltub mustri rakuline või koeline organisatsioon, mis piirab hüdrolüüsi seotud kumariini ensüüm. Midagi, mis häirib postuleeris muster organisatsioon ilma vahetu inaktiveerimise ensüümi, siis võib kiire moodustamise tasuta kumariini. Peaaegu puudub ja vaba kumariinitootja puutumata magusa ristik kude CuCuBB genotüübi võivad tuleneda kas (a) suutmatus, / 2-glükosidaasi hüdrolüüsi seotud kumariinitootja sellistest kudedest või (b) rike tasuta kumariini koguneda, sest kiire üleminek teised ühendid. Olemasolevad tõendid ei luba lõplikku valida nende alternatiive. Kui esimene on õige, postulation et B / b allelic paari kontrollib muutmise seotud kumariini vaba vorm puutumata tehas (5, 6) ilmselt on viga, mis on soovitust Schaef-fer et al. (11), et / ^-glükosidaasi on selle eest vastutav konverteerimise puutumata taim. Kui teine variant on õige, teiselt poolt, ei muutu pakutud rolle B / b alleele ja / 2-glükosidaasi on vaja. Aruande Kosuge ja Conn (7), et eksogeenselt tarnitud kumariini metaboliseerub kiires tempos, kusjuures melilotic hape on üks peamisi tooteid, annab mõned usutakse selle alternatiiv. Sõltumata sellest, mis variant on õige, või mõlemad on osaliselt õige, kui ei ole ilmset põhjust kahelda mõju B / b alleele on tase /?-Glükosidaasi aktiivsus valmistatud magus-ristik kudedes, nagu näitab Schaeffer et al. (11). OKKUVÕTE Aasta alguses tööd kumariinitootja sweetclover, eeldusel, tehti, et vabas vormis ühendi domineeriv puutumata taim. Järgnenud uurimiste näidanud juuresolekul seotud kumariini lisaks tasuta, ja see oli siis mõelnud, et mõlemad vormid on tavaliselt kohal. Hiljutine töö näitab, et kui sobiv kaevandamise menetlusi kasutatakse peaaegu kõik kumariini saadakse seotud kujul. Selline kaevandamise kord tuleb ette näha kiire inaktiveerimise ^-glükosidaasi, takistades sellega hüdrolüüsi seotud kumariini t ilmselt glükosiid c / ro-hydroxycinnamic acid) ajal ekstraktsioonil. Antud uuringus inaktiveerimise YG-glükosidaasi saavutati uputamise teel taime kudede keevas vees. Kui see samm võeti ekstraheerimise, lehtede proove 4. homosügootne genotüüpides (cucubb. cucuBB, CuCubb ja CuCuBB) ja 9 kumariini-ga, millel sorte sweetclover ja magus Kevadine rohi ja magus rohi leiti, et sisuliselt puudub vaba kumariini. Üldiselt mis tahes kohtlemine, mis põhjustas häireid rakuline või koeline organisatsiooni enne inaktiveerimise /?-Glükosidaasi tulemusena muutmise seotud kumariini vabas vormis. Seega, hooldus käitlemise taimne kude on väga oluline. Mõju ilmne puudumine vaba kumariinitootja puutumata sweetclover taim on arutatud seoses võimalike rollide B / b alleele ja / J-glükosidaasi sisse kumariini biosünteesi.
    1. Clayton, JS. ja Lakmour, RK võrdlev värvi test kumariin ja melilotic happe Melilotus liike. Võimalik. J. Res., Sec. С 13:89-100. 1935. 2. Ci.opton, JR määramine kumariini juuresolekul steroolid. J. Agr. ja Toiduameti Chem. 6:457-459. 1958. " 3.Duncan, IJ, ja prügivedaja, RB kvantitatiivne määramine kumariinitootja taimset materjali. Ind ja Eng, Chem., Anal. Ed. 6:210-213. 1934.
4. ANCI. Määramine kumariini magus ristik. Võrdlus aurufaasis destilleerimise ja alkohoolsete-ekstraheerimise meetodeid. Ind ja Eng. Chem., Anal. Ed. 9:471-474. 1937.
    5.Goplen, BP, Grej ". Nshihlds, Jer ja Baenzioer, H. pärandist kumariini magus ristik. Võimalik. ]. Botaanika 35:583-593. 1957. 6. Haskins, FA ja Gorz, HJ Fluorometric analüüsi vaba ja seotud kumariinitootja sweetclover. Agroni. J. 49M93-497. 1957. 7. Kosuge, Т.. ja Conn, EE metabolism aromaatseid ühendeid kõrgemaid taimi. I. kumariin ja o-coumanc hape. J. Biol. Chem. 234:2133-2137. 1959. 9. Roberts, WL ja Link. KP täpne meetod määramiseks kumariin, melilotic happe ja coumaric happe taimede kudedes. J. Biol. Chem. 119:269-281. 1937.
10. Ja. Määramine kumariini 11.ja melilotic hape. Kiire micromethod määramiseks in Avaldatud Crop Science (september-oktoober 1961) v.1, no. 12.Melilotus seemne ja rohelised kudedesse. Ind ja Eng. Chem., Anal.
    13.Rudorf, W., ja Schwarze, P. Beitriige zur Ziichtung eines cumarin-freien Steinklees und Untersuchungen iiber Cumarin und verwandte Verbindungen. Z. f. Pflanzenzucht. 39:245 - 274. 1958. Schaeffer, GW, Haskins, FA ja Gorz, HJ Genetic kontrolli kumariini biosünteesi ja / 3-glükosidaasi aktiivsus Melilotus alba. Biochem. ja Biophys. Res. Comm. 3:268-271. I960.
    14. Slatensf.k, JM ja Washburn, ER kiire, fluoro-meetermõõdustiku määramise meetodit kumariini ja seonduvad ühendid magus ristik. J. Am. Soc. Agroni. 36:704-708. 1944. Stevenson, Т. М. Ning Clayton, JS Uuringud võrreldes aretus kumariini-free magus ristik, Melilotus. Can. J. Res., Sec. С 14:153-165. 1936.
Published (Last edited): 27-12-2011 , source: http://digitalcommons.unl.edu/cgi/viewcontent.cgi?article=1255&context=agronomyfacpub